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顯微鏡核心實驗室

MICROSCOPY CORE LABORATORY

　　

　

 

　

　

　

　

　

　

　

　

 　
                                      使 用 規 則 　

版本:2018.10.19

一、目前電子顯微鏡只接受委託上機服務，不開放自行上機。

二、預約注意事項：

  1. 請透過核心實驗室送檢作業系統申請使用時數或檢體數 (該系統登錄畫面右方有操作手冊，可下載參閱)，完成申請後列印申請單至1J收檢櫃檯報到，於送檢時會安排檢體處理後可使用機台的日期與時段。院內計畫申請單不用加蓋計畫章；院外計畫(如科技部及國衛院)及長庚大學的使用者，皆需蓋計畫章及計畫主持人需簽名。
  2. 本項儀器之收費標準計算耗材成本、儀器購置、維護保養等費用。請確認您的樣本準備良好，若並非儀器故障導致實驗結果不良，使用者仍必須依收費標準付費。
  3. 一個操作單位時間以小時計算，並於限定預約時間內完成實驗操作、分析及將實驗結果與分析資料燒錄到光碟的動作。實際使用時間未達預約時數者，以預約時數計費；若有超時的部分則以最小收費單位1小時計費。
  4. 若要取消，請於24小時前到核心實驗室送檢作業系統刪除單據。如無刪除，會按照預約的時數收費。
  5. 本中心會提供光碟片，請自備光碟套，影像數據資料保留三個月(本中心負責人員將不定期整理電腦內非儀器操作所需之檔案資料)。

三、一般規定：

使用電子顯微鏡觀察紀錄檢體之品質需求
(依「送件注意事項」(MRD-SOP-MC-0010)作業)

  1. 檢體處理需注意的事項：
    1. 生物檢體：
      1. 請至本單位拿取固定液
      2. 取樣時請保存於固定液中且以4℃低溫下盡速送件
      3. 請特別注意組織方向性的問題。
    2. 檢體樣品規格：
      1. 組織：
        1. TEM檢體：組織塊大小需小於2 x 2 x 2 mm3。
        2. SEM檢體：組織塊大小需小於10 x 10 x 2 mm3。
        3. 上述a.及b.，若為眼角膜與視網膜 (含脈絡膜及鞏膜) 的檢體，因考慮方向性及視網膜容易剝離問題，則不需裁切成前述大小，只要厚度小於2mm 即可。
      2. 細胞：106 cells以上。
      3. 自備SEM檢體：
        1. 平面之長寬需小於直徑2 cm和高2 cm。
        2. 剖面之長寬需小於長2 cm，高度為 1 cm
        3. 樣品需乾燥且無揮發性。
        4. 拒收含有毒性、腐蝕性、爆炸性、放射性及磁性等之樣品。
      4. 自備TEM檢體：樣品規格為直徑3 mm，厚度0.1 mm，
        薄區或切片厚度約90 nm


四、試驗流程如需符合ISO17025: 2005規範：

  1. 本中心依「醫學研究發展部穿透式電子顯微鏡檢體處理標準書」(MRD-SOP-MC-009) ；「醫學研究發展部製刀機操作標準書」(MRD-SOP-MC-006)；「醫學研究發展部超薄切片機操作標準書」(MRD-SOP-MC-007)；「醫學研究發展部穿透式電子顯微鏡操作標準書」(MRD-SOP-MC-003) ；「醫學研究發展部配製試劑標準書」(MRD-SOP-MC-011) 執行試驗。
  2. 本中心所使用的主要儀器設備：Hitachi H-7500 穿透式電子顯微鏡、Leica EM KMR2 製刀機、Leica EM UC6 超薄切片機。
  3. 送件樣品為哺乳類動物無特定方向性之組織塊。
  4. 組織塊大小需小於 2 × 2 × 2 mm3。
  5. 送件者將檢體取下後：
    1. 放入3% Glutaraldehyde + 2% Paraformaldehyde in 0.1M cacodylate buffer (pH 7.4)中，須避光，且置於4℃冰箱內2小時。
    2. 換上0.5% Glutaraldehyde in 0.1M cacodylate buffer (pH 7.4) ，須避光，於4℃下，送至本中心。
    3. 客戶取檢體前，應先至本中心拿取上述兩種固定液。
  6. 送件者於送件時需詳實填寫「穿透式電子顯微鏡送件清單」(MRD-SOP-MC-016-F01)及「試驗委託單(顯微鏡核心實驗室)」(MRD-SOP-MC-016-F02)。
  7. 如樣品有以下情形者，則不予以收件：
    1. 經0℃以下冷凍過之組織。
    2. 檢體取下後浸泡過其他非本中心提供固定液溶液之組織。
    3. 無法完全浸泡在固定液中的組織(例如：組織塊浮在固定液上)。
  8. 檢體收件時間統一為每周五上午9:00至下午3:00，收件日下個周一視為第一個工作天，發報告時間為20個工作天(如果一次送件超過12個檢體，發報告時間會依比例調整)。
五、使用者於論文發表時，需於致謝欄中提及「感謝長庚醫療財團法人林口長庚紀念醫院顯微鏡核心實驗室之技術支援」（The authors wish to thank for technical assistance of Microscopy Core Laboratory, Chang Gung Memorial Hospital, Linkou）本中心之服務，以學術研究為主，凡向本中心申請表列之各項服務，請於成果發表時於文章的致謝欄中說明。這對於我們申請經費、維持服務品質，都會有很大的幫助。請將發表的著作複印一份寄給我們或告訴我們刊載的期刊年份卷數、頁數及著作題目，無限感激！

　

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