Page 46 - @林口醫研部201909電子報

撰稿者:肝臟研究中⼼ 朱育德博⼠ 校稿者:肝臟研究中⼼ 葉昭廷主任

‣研究背景

⾙樂克是⼀種抗病毒藥物, 為核苷類似物, 已被廣泛⽤於抗慢性⼄型肝炎病毒(HBV)感染治療中。儘管

其抑制⼄型肝炎病毒複製相當有效, 仍有⼀定量的肝硬化患者在⾙樂克治療後發展為肝細胞癌(HCC)。據推

測, 若病患肝臟已存在癌前期肝細胞, 則其仍具發展為癌症之可能。⼄型肝炎病毒X蛋⽩(HBx)是⼀種著名的

致癌蛋⽩。故於此篇論⽂中, 我們探討在接受⾮優化之⾙樂克治療⽽產⽣肝細胞癌的患者中, 其HBx基因中

發⽣促進癌化之突變株的可能性。

‣研究成果

從2010年1⽉⾄2012年12⽉, 接受過⾙樂克治療的患者中有5名先後產⽣肝細胞癌。其中, 3名患者

(Pt-4571, Pt-7303和Pt-7901), 在診斷出肝細胞癌時可檢測到⼄型肝炎病毒DNA。此三名患者之⾙樂克治

療(每天0.5毫克)分別持續2年、2年和3年。在治療期間, Pt-4571和Pt-7303之⼄型肝炎病毒DNA未被完全

抑制(分別為⼩於和⼤於2 log10/mL), 但在Pt-7901中則被完全抑制。根據台灣健保政策, ⾙樂克療程為24-

36個⽉。⽽在抗病毒療程結束後, 此三病⼈分別在9、11和15個⽉後被診斷出肝細胞癌(圖1A-C)。將肝細胞

癌診斷時之⾎清樣品進⾏DNA定序後發現, 3名患者都攜帶HBx的⾮同義突變(圖1D), 包括兩個肝臟疾病相

關突變, K130M和H94Y, 和兩個未被報導過的突變, G32R和L123S。

將X編碼區插⼊載體中並轉染到J7細胞後, 發現野⽣型HBx轉染的細胞中增殖能⼒顯著增強。但野⽣型

和突變體間無顯著差異。然⽽, 當與具有複製能⼒的⼄型肝炎病毒基因組共轉染時, 與野⽣型相⽐, Pt-

7303-和Pt-7901衍⽣的突變體顯著增強細胞增殖(圖2A, B)並抑制細胞凋亡(圖2C)。此外, 所有HBx突變體

皆具降低⼄型肝炎病毒核⼼啟動⼦之轉錄能⼒, 且皆在pre-S1, 核⼼和X啟動⼦上具有不同的激活能⼒(圖

2D, E)。最後, ⻄⽅墨點法分析中顯⽰ERK和AKT此兩種在肝細胞癌中扮演重要⾓⾊之訊息傳遞因⼦之受磷

酸化激活程度在HBx突變體表達細胞中顯著升⾼(圖2F)。

本篇中, 我們發現三種不同的HBx突變體, 含已知或未知的突變, 會在⾮優化之⾙樂克治療後出現(圖

1)。其中兩個在依賴具複製能⼒的⼄型肝炎病毒存在下促進細胞增殖之能⼒明顯⼤於野⽣型(圖2)。於回顧

臨床病史後, 發現在肝細胞癌發⽣前, 3個患者⾎清中⼄型肝炎病毒DNA皆會升⾼, 或許此⼀現象提供了具有

複製能⼒的⼄型肝炎病毒於此些HBx突變株進⽽造成肝細胞癌發⽣(圖1A-C)。另外, 在Pt-7901中發現的

H94Y和K130M雙重突變亦已知與肝細胞癌及其他種嚴重的肝臟疾病有關。

總之, 我們在⾙樂克治療過的肝細胞癌患者中發現了HBx突變。突變體增強ERK1/2-和AKT介導的信號,

並以依賴具複製能⼒的⼄型肝炎病毒存在之⽅式促進細胞增殖。根據我們的研究結果, ⾮優化的病毒抑製或

藥物停⽌可能對慢性⼄型肝炎患者有害, 尤其是這些帶有特定HBx突變之病⼈。本論⽂發表於「肝臟學期刊

(Hepatology)」。

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