Page 28 - 林口醫研部2022年12月電子報
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(C)實驗結果驗證
i.運用共聚焦顯微鏡驗證新發現的近曲小管細胞:ScRNA-seq/snRNA-
seq的研究,非常注重對於生物醫學分析的結果的驗證。我在腎臟纖維化
的小鼠snRNA-seq實驗中發現四種新型態的近曲小管細胞,我選擇利用共
聚焦顯微鏡來驗證這些細胞確實存在。
利用生物醫學分析,可以找到在各個新型態近曲小管細胞有特異性
表現的代表基因。我利用基因表現特徵圖(feature plot),確認代表基因在
細胞群的基因表現量及特異性,並利用免疫組織染色確認此基因轉譯出
的蛋白質可以被抗體偵測。之後我利用免疫螢光染色,透過高倍共聚焦
顯微鏡確認細胞的型態。結果如下圖。其中Havcr1為New-PT3的代表基因,
Akap12/Ncam1/Wt1為New-PT2 的代表基因,而New-PT1則為一個中介型
,作為正常PT S1-S3及新發現的近曲小管細胞之間的轉換細胞型態,其代
表基因為Vcam1。
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