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臨床蛋白質體核心實驗室

Clinical Proteomics Core Laboratory

 

 


 

 

 

 

 

 

 

 

 
                                   使 用 規 定    

所有測試恕不接受具放射性或感染性之樣品

IEF+2DE:
蛋白溶液之鹽等濃度須小於25mM (如過鹽類過高請先完成淨化處理)。
蛋白質溶液不得含有非電中性之介面活性劑、緩衝劑、混濁物或黏稠物。
請提樣品之相關資料(製備程序、濃度等)及擬分離之pH及分子量範圍

膠片染色(Coomassie blue):
蛋白偵測靈敏度差約0.1-0.5mg/spot(band),2DE膠體適用於蛋白質進樣量≦800 ug/gel

膠片染色(Silver stain):
蛋白質測靈敏度約>0.5ng/spot(band) ,2DE膠體適用於蛋白質進樣量≦250ug/gel且依實驗需求,建議客戶陪同決定最終呈色時間

膠片染色(SYPRO Ruby stain):
蛋白質測靈敏度約0.3-0.5ng/spot(band) , 2DE膠體適用於蛋白質進樣量≦800ug/gel

MALDI-TOF MS profiling:
適用於以HCCA 為介質,偵測 800~4000 m/z 的正電荷離子的例行測量。其他範圍請委測者另洽核心實驗室,並請提供擬測正或負電荷離子及其質量範圍。

蛋白質膠內酵素水解:
適用小於 2x2x2 mm 之PAGE膠體。其他範圍請委測者另洽核心實驗室。
膠體染色建議使用SYPRO Ruby。
傳統銀染法不適用於質譜儀分析,請使用改良式硝酸銀染色法。

蛋白質身份鑑定PMF:
樣品為 0.1~1 picomole 單一蛋白或單純化蛋白質樣品(如取自2DE分離後之單一蛋白點),以酵素水解後的胜肽。樣品少鹽且不得含有界面活性劑。
請附上SDS-PAGE或2D電泳圖,或其他純化圖譜 (如HPLC或其他層析)

蛋白質身份鑑定MS/MS (MALDI-TOF/TOF MS):
樣品為 0.1~1 picomole 單一蛋白或單純化蛋白質樣品 (如取自2DE分離後之單一蛋白點),以酵素水解後的胜肽。樣品少鹽且不得含有界面活性劑。

資料庫比對分析(Mascot):
比對 SwissProt 及 NCBI 公開之常用蛋白質資料庫,其中除human, mouse , rat 之外,其他物種請提供詳細的種名及其在 NCBI 的蛋白質資料庫資訊。
非 SwissProt 及 NCBI 公開之蛋白質資料庫,或擬委建使用者研究的蛋白質序列資料庫

蛋白質身份鑑定(LC-MS/MS)
樣品需為經去鹽且不含有機溶劑及脂類清潔劑之酵素水解胜肽檢體

如有任何疑問或諮詢需求請洽核心實驗室
人員(03)328-1200#7723 。

 

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