Page 26 - 林口醫研部12月電子報
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利用multi-step recombinant DNA cloning techniques在Vectors上構建
Expression 質體plasmids 並且transformed into the E. coli expression strain
BL21(DE3)開始製造Protein。因為該菌株中大腸桿菌Escherichia coli (E. Coli)
BL21(DE3)具有T7-lac promoter的特性，加入isopropyl-β-D-galactoside (IPTG)
使T7 RNA polymerase 開始Induction，並且基於elastin-like sequences會有低
臨界溶液溫度(Lower Critical Solution Temperature，LCST)特性，使它們可
以在4°C溶解 (solubilization) and 37°C下沉澱(precipitation)藉以純化,合成和
製造細胞外間質負責媒介細胞附著的蛋白質，例如玻連蛋白(vitronectin)
的Arg-Gly-Asp（RGD）由Arginie精氨酸，Glycine甘氨酸和Aspartate天冬氨
酸tripeptide(三肽)組成，或是合成另一類的控制組RDG 。
▲圖二、利用DNA cloning技術製造出的Plasmin質體。
之後會利用大腸桿菌生產RGD or RDG polypeptides。
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