嘉義長庚醫院/長庚科大發表論文貴重儀器應用簡述

(2024年10月-2025年1月)

 
項次 論文
1 Hong Haifeng, Lin Changhui, Fang Min, Liu Juntian, Hsu Hung‐Chih(許宏志醫師), Chang Chih‐Jung* and Wang Haibing* (2024). "Proteomic analysis of exosomal proteins associated with bone healing speed in a rat tibial fracture model." Biomedical Chromatography 38(5): e5846.
先分別從3種大鼠骨折癒合模型(正常組、快速癒合組和慢速癒合組)中採收脛骨組織,並以差速超速離心法分離出外泌體(exosome)後進行染色,再利用流式細胞分析儀檢測其CD63、CD81蛋白的表達水平。
2 Hsu Ching-Yun, Huang Tse-Hung, Lin Zih-Chan(林資展博士), Chen Chih-Jung, Hwang Erica, Chen Wei-Jhang and Fang Jia-You* (2024). "Synergistic Fat-Reducing Effect of Deoxycholic Acid and Rhein in Lipid-Based Nanoparticles with Reduced Toxicity for Obesity Treatment." International Journal of Nanomedicine: 12129-12151.
流式細胞分析儀檢測前脂肪細胞(3T3-L1)對有無負載脫氧膽酸(deoxycholic acid, DA)的脂質奈米顆粒(squarticles)之攝取量(奈米顆粒以螢光染料Rhodamine 800進行標記);以及檢測處理不同濃度之遊離或奈米顆粒形式的脫氧膽酸(DA)+大黃酸(rhein)組合對前脂肪細胞(3T3-L1)或皮膚纖維母細胞(Hs68)的影響,分析細胞凋亡表現(Annexin V+PI標定)。
為了評估奈米粒子載體Squarticles與脂肪細胞的相互作用和內化程度,將其標記紅色螢光rhodamine 800,再以共軛焦顯微鏡拍攝追蹤Squarticles被脂肪細胞之攝入情形,藉由與螢光染劑LysoTracker (green)標記之共定位分析,顯示Squarticles進入脂肪細胞後大多數被溶酶體所捕獲。
3 Fang Jia-You, Huang Kuo-Yen, Wang Tong-Hong, Lin Zih-Chan(林資展博士), Chen Chin-Chuan, Chang Sui-Yuan, Chen En-Li, Chao Tai-Ling, Yang Shuenn-Chen, Yang Pan-Chyr* and Chen Chi-Yuan* (2024). "Development of nanoparticles incorporated with quercetin and ACE2-membrane as a novel therapy for COVID-19." Journal of Nanobiotechnology 22(1): 169.
先使用聚乳酸-乙醇酸共聚物PLGA奈米粒子(NPs)製作單獨包覆槲皮素quercetin (NP-Q)、血管收縮素轉化酵素2(ACE2)細胞膜 (CM-NP)以及同時含有槲皮素和ACE2細胞膜(CM-NP-Q)的奈米粒子,並以ACE2-Alexa Fluor 647抗體進行染色後,再利用流式細胞分析儀檢測ACE2蛋白表現;另外製作以螢光染料Rhodamine 800進行標記的NP-R及CM-NP-R奈米粒子,分別與人類肺腺癌細胞(H1975、A549)共同培養24小時後,再利用流式細胞分析儀檢測細胞攝取奈米粒子量(Rhodamine螢光強度)。
共軛焦顯微鏡檢測Rhodamine 800紅色螢光標記之奈米顆粒(NP-R和CM-NP-R)在H1975和A549細胞中的內化情況、及其內化後在細胞內的定位。




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