嘉義長庚醫院/長庚科大發表論文貴重儀器應用簡述

(2024年7月-2024年10月)

 
項次 論文
1 Lee I-Yun(李懿芸醫師), Wang Ting-Chung, Kuo Yu-Jen, Shih Wei-Tai, Yang Pei-Rung, Hsu Cheng-Ming, Lin Yu-Shih, Kuo Ren-Shyang and Wu Ching-Yuan*(吳清源醫師) (2024). "Astragalus Polysaccharides and Metformin May Have Synergistic Effects on the Apoptosis and Ferroptosis of Lung Adenocarcinoma A549 Cells." Current Issues in Molecular Biology 46(8): 7782-7794.
流式細胞分析儀檢測單獨或組合處理不同濃度的中藥黃耆萃取物黃耆多醣(Astragalus polysaccharides, APS)和降血糖藥二甲雙胍(Metformin)對人類非小細胞肺癌細胞(A549)的影響,包含分析細胞凋亡Annexin V表現、粒線體膜電位變化(JC-1標定)、細胞內活性氧ROS濃度(DCFDA標定)。
2 Lu Chung-Kuang(盧重光博士), Lung Jrhau(龍志浩博士), Shu Li-Hsin, Liu Hung-Te, Wu Yu-Huei, Lin Yu-Shih, Yang Yao-Hsu, Wu Yu-Heng and Wu Ching-Yuan*(吳清源醫師) (2024). "The Inhibiting Effect of GB-2, (+)-Catechin, Theaflavin, and Theaflavin 3-Gallate on Interaction between ACE2 and SARS-CoV-2 EG.5.1 and HV.1 Variants." International Journal of Molecular Sciences 25(17): 9498.
人胚胎腎細胞(HEK 293T)轉染pCEP4-MYC-ACE2表達質體後以不同濃度的抗SARS-CoV-2預防配方-結緣草本淨口液(GB-2)或(+)-兒茶素((+)-catechin)、甘草酸(Glycyrrhizic acid)、茶黃素(Theaflavin)、茶黃素 3-沒食子酸酯(Theaflavin 3-Gallate, T3G)進行預先處理,然後加入來自293T細胞轉染Omicron變異體EG.5.1或HV.1型之pcDNA3-SARS-CoV-2-S-RBD-sfGFP表達質體後收集的RBD-sfGFP條件培養基及MYC抗體進行培養後,利用流式細胞分析儀檢測MYC及GFP表現,以評估GB-2或甘草酸、(+)-兒茶素、茶黃素、T3G對SARS-CoV-2 假型慢病毒變異體感染效率的影響,以及對人體細胞表面的血管收縮素轉化酵素2(ACE2)及SARS-CoV-2表面刺蛋白(Spike Protein)的受體結合區域(RBD)之間結合的影響。
3 Chen Chun-Han(陳君漢醫師), Chen Chih-Jung, Huang Yi-Ching, Huang Po-Shuan, Chi Hsiang-Cheng, Chuang Huei-Chieh, Lin Meng-Hung, Huang Tzu-Hao, Hsu Jun-Te and Chen Cheng-Yi* (2023). "Secreted Frizzled-Related Protein 4 Induces Gastric Cancer Progression and Resistance to Cisplatin and Oxaliplatin via β-Catenin Dysregulation." Chemotherapy 69(3): 150-164.
使用共軛焦顯微鏡分析β-catenin的免疫螢光染色結果,觀察該蛋白在順鉑耐藥(Cisplatin Resistant, CR)、奧沙利鉑耐藥(Oxaliplatin Resistant, OR)及BGC-823人類胃癌細胞中的表達和定位,以理解sFRP4如何影響β-catenin的核轉位現象,進而深入研究胃癌的化療抗藥性及其相關機制。
以缺氧/再復氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)處理的大鼠心肌細胞(H9c2)模擬體內心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)損傷。利用流式細胞分析儀檢測有無預先處理脂肪幹細胞外泌體(ADSC-Exos)、粒線體靶向抗氧化劑(MitoTEMPO)、粒線體分裂抑制劑(Mdivi-1)或轉染Mir221-和Mir222-模擬物,對後續分別處理PM(細懸浮微粒<4μm)、H/R及PM+H/R組合之H9c2細胞的影響,包含分析細胞凋亡表現(Annexin V+PI標定)、粒線體活性氧ROS濃度(MitoSOX Red+TO-PRO-3標定)、細胞內活性氧ROS濃度(DCFH-DA+PI標定)、細胞內超氧陰離子水平(DHE+DiOC 6 (3)標定)、粒線體膜電位變化(JC-1標定)。
4 Chang Wan-Ling(張婉玲醫師), Yang Kai-Chien, Peng Jyun-Yu, Hong Chain-Lang, Li Pei-Ching, Chye Soi Moi, Lu Fung-Jou, Shih Ching-Wei and Chen Ching-Hsein* (2024). "Parecoxib Enhances Resveratrol against Human Colorectal Cancer Cells through Akt and TXNDC5 Inhibition and MAPK Regulation." Nutrients 16(17): 3020.
人類結腸癌細胞(DLD-1)經單獨或組合處理帕瑞昔布Parecoxib (一種選擇性COX-2特異性抑制劑)和天然的多酚化合物白藜蘆醇(Resveratrol)培養不同時間點後,再以流式細胞分析儀檢測分析細胞內活性氧ROS濃度(DCFH-DA標定)。
5 Lee Tzu-Lin, Shen Wen-Chi, Chen Ya-Chun, Lai Tsai-Chun, Lin Shu-Rung, Lin Shu-Wha, Yu I. Shing, Yeh Yen-Hsiu, Li Tsai-Kun, Lee I. Ta, Lee Chiang-Wen*(李江文老師) and Chen Yuh-Lien* "Mir221- and Mir222-enriched adsc-exosomes mitigate PM exposure-exacerbated cardiac ischemia-reperfusion injury through the modulation of the BNIP3-MAP1LC3B-BBC3/PUMA pathway." Autophagy: 1-20.
使用共軛焦顯微鏡觀察C57BL/6小鼠心肌細胞的免疫螢光染色結果,透過BNIP3、LC3B與粒線體內膜蛋白COX4的雙重染色,觀察PM(細懸浮微粒)、H/R(缺氧再氧合)及PM+H/R組別中BNIP3及LC3B蛋白的表現,並分析這些蛋白與粒線體的共定位,以評估細胞自噬的活化情形。
6 Huang Tzu-Hsiung(黃次雄專業呼吸治療師), Lin Chieh-Mo, Lin Chin-Kuo, Chang Shun-Fu and Shi Chung-Sheng*(石宗憲老師) (2024). "The blockade of neddylation alleviates ventilator-induced lung injury by reducing stretch-induced damage to pulmonary epithelial cells." Biochemical Pharmacology 229: 116533.
模擬肺呼吸機誘發肺損傷(VILI)的小鼠模型,預先腹腔注射對照製劑DMSO或Neddylation抑制劑(MLN4924),再透過高潮氣容積(High tidal volume, HTV)通氣引起急性肺損傷,製備肺組織單細胞懸浮液染色後利用流式細胞分析儀檢測其CD11b、F4/80、Ly6C的表達水平,以鑑定及量化嗜中性白血球(neutrophils)或單核細胞(monocytes)亞型。 健康小鼠肺組織單細胞懸浮液先利用磁珠套組篩選出表現CD11b+的細胞,再利用流式細胞分選儀進一步篩選出Ly6C-High單核細胞及嗜中性白血球,培養後用於後續實驗。 人類肺泡上皮細胞先接種培養在有poly-L-lysine塗層的矽膠培養盤上,以對照製劑DMSO或Neddylation抑制劑(MLN4924)處理培養1小時,再利用儀器進行機械式循環拉伸(Cyclic stretching, CS),最後透過流式細胞分析儀檢測細胞凋亡表現(TUNEL染色標定)。




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