嘉義長庚醫院/長庚科大發表論文貴重儀器應用簡述

(2023年7月-2023年10月)

 
項次 論文
1 Hill William, Lim Emilia L., Weeden Clare E., Lee Claudia, Augustine Marcellus, Chen Kezhong, Kuan Feng-Che(官鋒澤醫師), Marongiu Fabio, Evans Edward J., Moore David A., Rodrigues Felipe S., Pich Oriol, Bakker Bjorn, Cha Hongui, Myers Renelle, van Maldegem Febe, Boumelha Jesse, Veeriah Selvaraju, Rowan Andrew, Naceur-Lombardelli Cristina, Karasaki Takahiro, Sivakumar Monica, De Swapnanil, Caswell Deborah R., Nagano Ai, Black James R. M., Martínez-Ruiz Carlos, Ryu Min Hyung, Huff Ryan D., Li Shijia, Favé Marie-Julie, Magness Alastair, Suárez-Bonnet Alejandro, Priestnall Simon L., Lüchtenborg Margreet, Lavelle Katrina, Pethick Joanna, Hardy Steven, McRonald Fiona E., Lin Meng-Hung(林孟宏博士), Troccoli Clara I., Ghosh Moumita, Miller York E., Merrick Daniel T., Keith Robert L., Al Bakir Maise, Bailey Chris, Hill Mark S., Saal Lao H., Chen Yilun, George Anthony M., Abbosh Christopher, Kanu Nnennaya, Lee Se-Hoon, McGranahan Nicholas, Berg Christine D., Sasieni Peter, Houlston Richard, Turnbull Clare, Lam Stephen, Awadalla Philip, Grönroos Eva, Downward Julian, Jacks Tyler, Carlsten Christopher, Malanchi Ilaria, Hackshaw Allan, Litchfield Kevin, Consortium T. RACERx, DeGregori James, Jamal-Hanjani Mariam and Swanton Charles* (2023). "Lung adenocarcinoma promotion by air pollutants." Nature 616(7955): 159-167.
使用肺腺癌(LUAD)基因工程小鼠模型並誘導小鼠肺部致癌性人類EGFR L858R的表達,再依實驗時程將小鼠暴露於不同劑量的細懸浮微粒(PM)或PBS(對照組)後收集肺部細胞進行免疫染色(MHC-II、CD45、PD-L1、Ly6C、CD24、CD206、CD86、CD11c、Ly6G、CD11b、CD64、EpCAM、Ter119、CD45、CD31、CD49f、SiglecF),後續利用流式細胞分析儀檢測鑑定及量化不同細胞族群,包含肺泡巨噬細胞Alveolar Macrophages (AM)、間質巨噬細胞Interstitial Macrophages (IM)、嗜中性白血球Neutrophils、樹突狀細胞Dendritic cells或上皮細胞Epithelial cells;以及透過流式細胞分選儀篩選出第二型肺泡上皮細胞AT2 cells (MHC Class II+ CD49flow EpCAM+ CD45− CD31− Ter119−)、肺泡巨噬細胞AM (CD45+ CD64+ SiglecF+ CD11blow)或間質巨噬細胞IM (CD45+ CD64+ SiglecF– CD11bhigh),用於後續實驗。
類器官形成能力(organoid-formation efficiency, OFE)是一種衡量正常或癌症幹細胞或前驅細胞(progenitor cell)形成器官體能力的指標,在肺腺癌的研究中常被用來評估肺泡型II細胞(alveolar type 2 cells, AT2 cells)的功能。AT2細胞在肺部具有自我更新和分化成肺泡型I細胞的能力,因此被認為具有前驅細胞的特性。在肺部受損後,AT2細胞可以進入一種更活躍的前驅細胞樣態(progenitor-like state),以促進肺部的修復。已有研究顯示,肺腺癌可能起源於AT2細胞,當這些細胞發生基因突變(如EGFR突變),它們可能會開始異常增生,導致腫瘤的形成,在這種情況下,AT2細胞的前驅細胞樣態可能會被激活,使它們更有可能參與腫瘤的形成和發展。本篇論文透過共軛焦顯微鏡觀察帶有紅色螢光(tdTomato)的ET小鼠(EGFRL858R mutant mice)之AT2細胞,分別與暴露於PM(懸浮微粒)或PBS(對照組)之巨噬細胞共同培養後,發現暴露於PM的巨噬細胞相較於對照組提升了AT2細胞OFE的能力。後續再以更多實驗證實PM會導致大量的巨噬細胞湧入肺部並釋放IL-1β,此過程會使帶有EGFR突變的AT2細胞處於一種前驅細胞樣態,進而推動肺腺癌的形成。
2 Wu Ching-Yuan*(吳清源醫師), Yang Yao-Hsu, Lin Yu-Shih, Shu Li-Hsin, Cheng Yu-Ching, Liu Hung-Te, Lin Yin-Yin, Lee I. Yun, Shih Wei-Tai, Yang Pei-Rung, Tsai Ying-Ying, Chang Geng-He, Hsu Cheng-Ming, Yeh Reming-Albert, Wu Yu-Huei, Wu Yu-Heng, Shen Rou-Chen and Tsai Ming-Shao*(蔡明劭醫師) (2023). "The anti-SARS-CoV-2 effect and mechanism of Chiehyuan herbal oral protection solution." Heliyon 9(7): e17701.
人胚胎腎細胞(HEK 293T)轉染pCEP4-MYC-ACE2表達質體後以不同濃度的抗SARS-CoV-2預防配方-結緣草本淨口液(GB-2)或甘草酸Glycyrrhizic acid進行預先處理,然後加入來自293T細胞轉染Omicron變種(BA.1)型或不同突變點組合(N501Y-K417N-E484A-G339D-Q493R-G496S-Q498R、L452R-D614G、T478K-D614G、L452R-T478K、L452R-T478K-D614G)變異體之pcDNA3-SARS-CoV-2-S-RBD-sfGFP表達質體後收集的RBD-sfGFP條件培養基及MYC抗體進行培養後,利用流式細胞分析儀檢測MYC及GFP表現,以評估GB-2或甘草酸對SARS-CoV-2 假型慢病毒變異體感染效率的影響,以及對人體細胞表面的血管收縮素轉化酵素2(ACE2)及SARS-CoV-2表面刺蛋白(Spike Protein)的受體結合區域(RBD)之間結合的影響。
3 Su Hui-Chen, Sun Yuan-Ting, Yang Ming-Yu, Wu Ching-Yuan(吳清源醫師) and Hsu Cheng-Ming*(徐正明醫師) (2023). "Dihydroisotanshinone I and BMAL-SIRT1 Pathway in an In Vitro 6-OHDA-Induced Model of Parkinson’s Disease." International Journal of Molecular Sciences 24(13): 11088.
流式細胞分析儀檢測有無預先處理中藥丹蔘萃取物二氫異丹蔘酮 I (DT)對後續處理不同濃度6-OHDA(一種可誘發類帕金森氏症神經退化的誘導劑)之人類神經母細胞瘤細胞(SH-SY5Y )的影響,包含分析細胞凋亡Annexin V表現、細胞內活性氧ROS濃度(DCFH-DA標定)。
4 Chen Vincent Chin-Hung(陳錦宏醫師), Huang Shao-Lan, Huang Jing-Yu, Hsu Tsai-Ching*, Tzang Bor-Show* and McIntyre Roger S. (2023). "Combined Administration of Escitalopram Oxalate and Nivolumab Exhibits Synergistic Growth-Inhibitory Effects on Liver Cancer Cells through Inducing Apoptosis." International Journal of Molecular Sciences 24(16): 12630.
流式細胞分析儀檢測單獨或組合處理不同濃度之抗抑鬱藥物Escitalopram Oxalate和T淋巴球PD-1免疫檢查點抑制劑Nivolumab對肝癌細胞(HepG2)的影響,包含分析細胞週期比例(PI標定)、細胞凋亡Annexin V表現。
5 Shi Chung-Sheng(石宗憲老師), Kuan Feng-Che(官鋒澤醫師), Chin Chih-Chien(靳志堅醫師) and Li Jhy-Ming (2023) "Modulation of mitochondrial apoptosis by β2-adrenergic receptor blockage in colorectal cancer after radiotherapy: an in-vivo and in-vitro study." American journal of cancer research 13, 3741-3752.
CRC大腸直腸癌細胞(HCT116、LS174T、HT29)先照射不同劑量的放射線,再處理不同類型及濃度之腎上腺素受體(AR)阻斷劑,包括Propranolol (β1/2-AR阻斷)、Atenolol (β1-AR阻斷)、ICI-118,551 (β2-AR阻斷),最後利用流式細胞分析儀檢測評估放射線聯合腎上腺素受體阻斷療法對大腸直腸癌細胞凋亡的影響(分析Annexin V表現)。
共軛焦顯微鏡拍攝HCT116細胞免疫螢光染色結果,觀察HCT116細胞在單獨處理ICI-118,551 (β2-AR阻斷)或是合併放射線處理後,p-P53、cytochrome C以及Mitotracker粒線體染劑的表現與分佈,評估β2-AR拮抗劑誘導CRC細胞凋亡之能力、進而改善放射治療之效果。




Counter for tumblr 瀏覽人次