共軛焦顯微鏡螢光玻片樣品封片膠選用建議

封片膠的功能為保護樣品、維持螢光訊號,對於獲得優質的成像品質至關重要,以下是挑選封片膠時需考慮之事項:

1.

應選用水溶性封片膠,而非有機溶劑基底之封片膠以避免破壞螢光。

2.

建議選用會固化的封片膠,避免蓋玻片滑動或沾染物鏡,並具有不需要再以指甲油封邊之方便性。

3.

固化型封片膠於固化後,其折射係數(Refractive Index, RI)越接近玻璃之RI(1.52),影像越清晰。

4.

含有DAPI的封片膠容易造成背景訊號,因此不建議使用,如需DAPI等其他對比染色,建議染色後再以不含螢光染劑之封片膠進行封片。

5.

購買前建議仍需詳細參閱商品data sheet之說明,選用與實驗螢光染劑或螢光蛋白相容性佳之封片膠,例如有些封片膠與Alexa flour系列螢光相容性較好,有些則與螢光蛋白的相容性較好。

摘列市售符合上述條件之封片膠如下表,提供實驗室同仁做為選購參考,相關問題請詢問共軛焦顯微鏡室技術員 蔡季庭 (分機 : 3949)。

廠牌

產品名稱

型號 / 規格

商品特性摘列 (參考原廠說明)

ProLong™ Gold Antifade Mountant

P36930 / 10 mL

P10144 / 2 mL

P36934 / 5 x 2 mL

  • RI (after curing) : 1.47
  • room-temperature storage
  • for long-term analysis of Alexa Fluor dyes in fixed samples

ProLong™ Diamond Antifade Mountant

P36970 / 10 mL

P36965 / 2 mL

P36961 / 5 x 2 mL

  • RI (after curing) : 1.52
  • 2–8°C storage
  • for long-term analysis of all dyes and fluorescent proteins in fixed samples

ProLong™ Glass Antifade Mountant

P36984 / 10 mL

P36982 / 2 mL

P36980 / 5 x 2 mL

  • RI (after curing) : 1.52
  • 2–8°C storage
  • for long-term analysis of all dyes and fluorescent proteins in fixed samples with best optical clarity and axial resolution for samples up to 150 μm thickness

VECTASHIELD Vibrance® Antifade Mounting Medium

H-1700-2 / 2 mL

H-1700-10 / 10 mL

  • RI (after curing) : 1.47
  • 4°C storage
  • hardens at room temperature in as little as 20 minutes

VECTASHIELD® HardSet™ Antifade Mounting Medium

H-1400-10 / 10 mL

  • RI (after curing) : 1.45
  • 4°C storage
  • hardens at room temperature in as little as 20 minutes

EverBrite™ Hardset Mounting Medium

23003 / 10 mL

  • RI (after curing) : 1.46
  • 2-8°C storage
  • forms hard seal after 24 h

EverBrite TrueBlack® Hardset Mounting Medium

23017-T / 2 mL

23017 / 10 mL

  • RI (after curing) : 1.46
  • 2-8°C storage
  • quenches lipofuscin autofluorescence background as it hardens

嘉義長庚紀念醫院 第二共同實驗室 共軛焦顯微鏡室 2023年7月製表

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