嘉義長庚醫院/長庚科大發表論文貴重儀器應用簡述

(2021年12月-2022年3月)

 
項次 論文
1 Lai Ying-Ju*(賴盈如老師), Kao Winston W. Y., Yeh Yung-Hsin, Chen Wei-Jan and Chu Pao-Hsien* (2021). "Lumican deficiency promotes pulmonary arterial remodeling." Translational Research 237: 63-81.
共軛焦顯微鏡搭配免疫螢光染色法,發現特發性肺動脈高壓(IPAH)患者肺組織平滑肌細胞(PASMC)lumican蛋白的表現較非患者不足,後續以更多實驗證實lumican蛋白缺失與病理性肺血管重塑的關聯。在動物實驗中,給予lumican C-端肽(lumikine)逆轉了lumican缺失小鼠低氧誘導之PAH的發病,可提供作為治療PAH的有效方向。
2 Farber Meike, Chen Yiyang(陳苡揚醫師), Arnold Lucas, Möllmann Michael, Boog-Whiteside Eva, Lin Yu-An, Reinhardt H. Christian, Dührsen Ulrich and Hanoun Maher* (2021). "Targeting CD38 in acute myeloid leukemia interferes with leukemia trafficking and induces phagocytosis." Scientific Reports 11(1): 22062.
從急性骨髓性白血病(AML)和健康對照患者的外周血分離出的單核細胞(PBMCs),以及AML細胞株(OCI-AML-3、Kasumi-1、MOLM-13、KG-1、OCI-M2、HL-60、K562、THP-1),分別與人類臍靜脈內皮細胞HUVEC或纖維母細胞MS-5共同培養後,處理化療用單株抗體daratumumab及治療藥物ATRA,再利用流式細胞分析儀檢測CD38、CD45、CD16的表達水平,細胞增殖分析(BrdU assay標定)、細胞凋亡Annexin V表現、粒線體轉移分析(MitoTracker標定)。
3 Lu Hsin-Ling, Wu King-Chuen(吳憬全醫師), Chen Char-Wen, Weng Hung-Kai, Huang Bu-Miin, Lin Ting-Yu, Liu Ming-Hsin, So Edmund-Cheung*, Lin Ruey-Mo* and Wang Yang-Kao* (2021). "Anticancer Effects of Midazolam on Lung and Breast Cancers by Inhibiting Cell Proliferation and Epithelial-Mesenchymal Transition." Life 11(12): 1396.
利用共軛焦顯微鏡觀察A549肺腺癌細胞β-catenin免疫螢光染色結果,以評估Midazolam藥物對TGF-β誘導癌細胞上皮細胞間質轉化(EMT)的抑制效果。
4 Lin Shang-Hung, Ho Ji-Chen(何宜承醫師), Li Sung-Chou, Cheng Yu-Wen, Hsu Chung-Yuan, Chou Wen-Yi, Hsiao Chang-Chun* and Lee Chih-Hung* (2022). "TNF-α Activating Osteoclasts in Patients with Psoriatic Arthritis Enhances the Recruitment of Osteoclast Precursors: A Plausible Role of WNT5A-MCP-1 in Osteoclast Engagement in Psoriatic Arthritis." International Journal of Molecular Sciences 23(2): 921.
先利用CD14磁珠套組從乾癬性關節炎(Psoriatic arthritis, PsA)及健康對照(HC)患者的外周血單核細胞(PBMCs)分離出表現CD14+的單核細胞,以進行後續實驗。從PsA患者分離出的CD14+單核細胞誘導分化成破骨細胞(monocyte-derived osteoclasts, MDOC),並收集其培養基上清液。在Transwell趨化性試驗中,於下室分別置放單純培養基、有/無添加 MCP-1抗體之PsA患者MDOC培養基上清液、添加MCP-1重組蛋白的培養基,並將從HC患者分離出的CD14+單核細胞置於上室,培養1小時後收集遷移至下室的細胞進行染色,再利用流式細胞分析儀檢測破骨細胞前體OCP (CCR2+RANK+)的比例。
5 Hsu Wei-Bin(徐維彬博士), Lin Shih-Jie, Hung Ji-Shiuan, Chen Mei-Hsin, Lin Che-Yi, Hsu Wei-Hsiu and Hsu Wen-Wei Robert*(許文蔚醫師) (2022). "Effect of resistance training on satellite cells in old mice–a transcriptome study: implications for sarcopenia." Bone & Joint Research 11(2): 121-133.
肌肉組織之衛星細胞位於肌纖維質和基底膜之間並有助於肌纖維的形成與重建,其數量隨年齡減少,為導致肌肉減少症的原因。利用Pax7與Laminin抗體分別標定肌肉衛星細胞與肌纖維基底膜,透過共軛焦顯微鏡拍攝小鼠股直肌組織切片免疫螢光染色結果,發現小鼠經阻力訓練後,每條肌肉纖維的衛星細胞比例因年齡導致的下降得到恢復,後續也進一步探討阻力訓練對促進衛星細胞增生之潛在機制。
6 Yang Jen-Tsung(楊仁宗醫師), Lee I-Neng, Chen Chun-Han, Lu Fung-Jou, Chung Chiu-Yen, Lee Ming-Hsueh, Cheng Yu-Ching, Chen Kuo-Tai, Peng Jyun-Yu and Chen Ching-Hsein*(陳俊憲老師) (2022). "Gallic Acid Enhances the Anti-Cancer Effect of Temozolomide in Human Glioma Cell Line via Inhibition of Akt and p38-MAPK Pathway." Processes 10(3): 448.
流式細胞分析儀檢測分別處理不同濃度之化療藥物Temozolomide (TMZ)、没食子酸Gallic acid (Ga)、TMZ+Ga組合對人類神經膠質瘤細胞(U87MG)的影響,包含分析細胞週期比例、活性氧ROS濃度(DCFDA標定)。
7 Tsai Ming-Shao(蔡明劭醫師), Shih Wei-Tai, Yang Yao-Hsu, Lin Yu-Shih, Chang Geng-He, Hsu Cheng-Ming, Yeh Reming-Albert, Shu Li-Hsin, Cheng Yu-Ching, Liu Hung-Te, Wu Yu-Huei, Wu Yu-Heng, Shen Rou-Chen and Wu Ching-Yuan*(吳清源醫師) (2022). "Potential inhibitor for blocking binding between ACE2 and SARS-CoV-2 spike protein with mutations." Biomedicine & Pharmacotherapy 149: 112802.
人胚胎腎細胞(HEK 293T)轉染pCEP4-MYC-ACE2表達質體後以不同濃度的抗SARS-CoV-2預防配方GB-1或甘草酸Glycyrrhizic acid進行預先處理,然後加入來自293T細胞轉染武漢型或不同突變點組合(K417N、K417T、E484K、N501Y、L452R)之pcDNA3-SARS-CoV-2-S-RBD-sfGFP表達質體後收集的RBD-sfGFP條件培養基及MYC抗體進行培養後,利用流式細胞分析儀檢測MYC及GFP表現,以評估GB-1或甘草酸對人體細胞表面的血管收縮素轉化酵素2(ACE2)及SARS-CoV-2表面刺蛋白(Spike Protein)的受體結合區域(RBD)之間結合的影響。
8 Lee Chiang-Wen(李江文老師), Huang Cathy Chia-Yu, Chi Miao-Ching, Lee Kuan-Han, Peng Kuo-Ti, Fang Mei-Ling, Chiang Yao-Chang*(江耀璋老師) and Liu Ju-Fang* (2022). "Naringenin Induces ROS-Mediated ER Stress, Autophagy, and Apoptosis in Human Osteosarcoma Cell Lines." Molecules 27(2): 373.
流式細胞分析儀檢測處理不同濃度之柑橘類黃酮柚皮素Naringenin對人類骨肉瘤細胞(HOS、U2OS )的影響,包含分析細胞凋亡Annexin V表現、DNA片段化程度(TUNEL assay標定)、細胞週期比例(PI標定)、細胞內活性氧ROS濃度(H2DCFDA標定)、Ca2+釋放水平(Fluo-4 AM標定)、粒線體膜電位變化(JC-1標定)。




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