嘉義長庚醫院/長庚科大發表論文貴重儀器應用簡述

(2021年9月-12月)

 
項次 論文
1 Lin Hui-Ling(林蕙鈴老師), Chiang Chen-En, Lin Mei-Chun, Kau Mei-Lan, Lin Yun-Tzu and Chen Chi-Shuo* (2021). "Aerosolized Hypertonic Saline Hinders Biofilm Formation to Enhance Antibiotic Susceptibility of Multidrug-Resistant Acinetobacter baumannii." Antibiotics 10(9): 1115.
共軛焦顯微鏡搭配螢光染劑,拍攝鮑氏不動桿菌(Acinetobacter baumannii)生物膜影像,以研究高張食鹽水氣霧處理(Aerosolized Hypertonic Saline)對抗藥性鮑氏不動桿菌生物膜結構的影響。
2 Chen Chih-Cheng(陳志丞醫師), Hsu Chia-Chen(許家禎博士), Chen Sung-Lin, Lin Po-Han, Chen Ju-Pei, Pan Yi-Ru, Huang Cih-En, Chen Ying-Ju, Chen Yi-Yang, Wu Yu-Ying and Yang Muh-Hwa* (2021). "RAS Mediates BET Inhibitor-Endued Repression of Lymphoma Migration and Prognosticates a Novel Proteomics-Based Subgroup of DLBCL through Its Negative Regulator IQGAP3." Cancers 13(19): 5024.
流式細胞分析儀檢測處理BET蛋白抑製劑(JQ1、AZD5153)、MEK蛋白抑製劑(Trametinib)及PI3K蛋白抑製劑 (Copanlisib)對瀰漫性大B細胞淋巴瘤細胞(SU-DHL-5、HT)的影響,包含分析細胞週期比例、細胞凋亡Annexin V表現。
先以編碼 iRFP713的表達質體轉染淋巴瘤細胞(HT-L1),利用流式細胞分選儀篩選出表達 iRFP713+的細胞(HT-L1-iRFP)培養後注射到小鼠脾臟中,3週後再依時程於腹腔注射不同蛋白抑製劑組(JQ1、AZD5153、AZD5153+Copanlisib)或對照溶劑組進行治療,並以活體螢光影像系統(FMT)檢測小鼠體內 iRFP713近紅外信號。
3 Lung Jrhau(龍志浩博士), Chen Yi-Chuan, Lin Yu-Ching, Li Ya-Chin, You Liang, Jablons David M, Mao Jian-Hua, Yang Cheng-Ta and Hung Ming-Szu*(洪明賜醫師) (2021). "The effect of cullin 4A on lung cancer cell chemosensitivity to paclitaxel through p33ING1b regulation." American Journal of Translational Research 13(10): 11194.
共軛焦顯微鏡拍攝非小細胞肺癌細胞(A549、NCI-H460)免疫螢光染色結果,觀察Cul4A基因過度表現(overexpression) 及基因減弱(knockdown) 對抑癌基因p33ING1b的影響,後續探討Cul4A經由對p33ING1b的調控,改變肺癌細胞對化療藥物紫杉醇(paclitaxel)的藥物敏感性,提供肺癌治療方向。
4 Kuo Hsing-Chun(郭星君老師), Liu Yen-Wenn, Lum Chi-Chin, Hsu Kai-Di, Lin Shin-Ping, Hsieh Chang-Wei, Lin Hui-Wen, Lu Tze-Ying* and Cheng Kuan-Chen* (2021). "Ganoderma formosanum Exopolysaccharides Inhibit Tumor Growth via Immunomodulation." International Journal of Molecular Sciences 22(20): 11251.
小鼠依口服靈芝胞外多醣(GF-EPS)不同給藥時程並於第11天注射路易斯氏肺癌細胞(LLC1)建立3種模型:分成對照組(32天持續給藥PBS)、預防模型(32天持續給藥GF-EPS)、治療模型(第14-32天持續給藥GF-EPS),再利用流式細胞分析儀檢測小鼠脾臟中免疫細胞群的比例,包括Th細胞(CD4+)、Tc細胞(CD8+)、B細胞(CD19+)、NK細胞(CD49b+)。
5 Lin Yu-Sheng(林祐賸醫師), Chang Tzu-Hao, Ho Wan-Chun, Chang Shun-Fu, Chen Yung-Lung, Chang Shih-Tai, Chen Huang-Chung, Pan Kuo-Li and Chen Mien-Cheng* (2021). "Sarcomeres morphology and Z-line arrangement disarray induced by ventricular premature contractions through the Rac2/cofilin pathway." International journal of molecular sciences 22(20): 11244.
大鼠心室心肌細胞(SV-40)經基因轉染沉默對照載體(siCTL)或RAC2蛋白沉默載體(siRac2)後,以流式細胞分析儀檢測有無沉默RAC2對SV-40中肌動蛋白(F-actin)含量的影響(Phalloidin標定染色)。
在右心室出口起源之二聯心室早期收縮(RVOT bigeminy VPC)猪模型組織中,利用共軛焦顯微鏡拍攝免疫螢光染色結果,觀察左心室心肌組織結構與正常心肌組織的差別,顯示VPC豬的心肌組織肌動蛋白結構失序且堆積於肌間盤( intercalated disc ),Z line排列紊亂、β-catenin蛋白增加與心肌細胞肥大,後續更進一步探討VPC誘導心肌細胞病變改變其細胞骨架的分子機制。
6 Lin Martin Hsiu-Chu(林修竹醫師), Chang Li-Ching, Chung Chiu-Yen, Huang Wei-Chao, Lee Ming-Hsueh, Chen Kuo-Tai, Lai Ping-Shan and Yang Jen-Tsung*(楊仁宗醫師) (2021). "Photochemical Internalization of Etoposide Using Dendrimer Nanospheres Loaded with Etoposide and Protoporphyrin IX on a Glioblastoma Cell Line." Pharmaceutics 13(11): 1877.
人類神經膠質瘤細胞(U87-MG)先經不同濃度之Etop(抗腫瘤藥物)、PpIX(原紫質,protoporphyrin IX)、同時負載Etop/PpIX的樹枝狀聚合物奈米粒子(Etop/PpIX-PAMAM(G5) Ns)處理培養數小時,再進行光療照射後,利用流式細胞分析儀檢測細胞攝取量(PpIX螢光強度),以及藥物照光後對細胞造成的影響,包含分析活性氧ROS濃度(DCFH2-DA標定)、細胞凋亡Annexin V表現。
利用偵測胞內酸性環境的螢光染劑LysoSensor Green DND-189標定溶酶體,透過共軛焦顯微鏡影像共定位(co-localization)分析顯示,由PAMAM(G5)樹枝狀聚合物攜帶topoisomerase II 抑制劑Etop及光敏劑PpIX形成之奈米小球(Etop/PpIX-PAMAM(G5) Ns),進入多形性膠質母細胞瘤細胞(U87-MG)後位於内吞溶酶体(endolysosome)內。光化學內化作用( Photochemical internalization)是利用光敏分子產生活性氧破壞生物膜,進而逃脫溶酶體對藥物的破壞,達到有效傳遞藥物至細胞質的一種技術,在後續實驗也顯示Etop/PpIX-PAMAM(G5) Ns可增加U87-MG細胞ROS與促進其細胞凋亡。
7 Lin Hao, Lan Kuo-Chung, Ou Yu-Che, Wu Chen-Hsuan, Kang Hong-Yo, Chuang I-Chieh and Fu Hung-Chun* (2021). "Highly Expressed Progesterone Receptor B Isoform Increases Platinum Sensitivity and Survival of Ovarian High-Grade Serous Carcinoma." Cancers 13(21): 5578.
卵巢癌細胞(OC-3-VGH、OVCAR-3)經基因轉染對照載體(pcDNA3)或孕酮受體B(PR-B)載體(pcDNA3-PRB)使其過度表達PR-B蛋白,以流式細胞分析儀檢測處理抗癌藥物順鉑(Cisplatin)對過度表達PR-B的卵巢癌細胞凋亡的影響(分析Annexin V表現)。
8 Yang Kung-Ssu, Che Pi-Cheng, Hsieh Ming-Ju, Lee I, Wu Yu-Ping, Chen Ming-Shan* and Chen Jui-Chieh* (2022). "Propofol induces apoptosis and ameliorates 5‑fluorouracil resistance in OSCC cells by reducing the expression and secretion of amphiregulin." Molecular Medicine Reports 25(1): 1-11.
流式細胞分析儀檢測靜脈麻醉劑-丙泊酚(Propofol)對人類口腔鱗狀細胞癌細胞(SAS、SCC9)凋亡的影響(分析Annexin V表現)。




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