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| 簡介 |
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流式細胞技術(flow cytometery)是現今生物醫學研究中不可或缺的基本技術之一。懸浮細胞檢體配合各種抗體與染劑的使用進行細胞標定後,利用流式細胞分析儀(Cell Analyzer)配備之雷射激發,可同時獲得細胞相對大小、細胞內部結構相對複雜度及螢光相對亮度等數據,以同時進行多種細胞功能與生物學特性的分析,例如分析細胞標記的種類與數量、細胞週期、細胞凋亡、細胞內鈣離子的濃度變化、粒線體膜電位的變化…等等。
※原理:
儀器運用液流加壓將樣品溶液裡的細胞送往分析槽(Flow Cell),由於管徑縮減,形成流體動力聚焦(Hydrodynamic Focusing),讓細胞成為單顆排列,依序通過打在分析槽上的雷射。每個細胞會與入射光源相互作用而產生散射光及螢光,產生的光學訊號再轉換成電子訊號,分析這些數據便可測量細胞的一系列重要物理特性及生化特性。
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| 廠牌型號 |
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BD FACSCanto II
 儀器負責人:林倖如 (聯絡電話:05-3621000 分機3949) |
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| 設備介紹 |
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| 1. |
儀器配備488nm與633nm兩支雷射光源,可同時偵測FSC(前方散射光)、SSC(側方散射光)及6種螢光訊號,設備規格如下表: |
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雷射光源 |
偵測器 |
LP鏡片
(nm) |
BP濾片 (nm) |
偵測範圍(nm) |
可偵測螢光染料或螢光蛋白 |
488nm 藍光雷射 |
Blue A |
735 |
780/60 |
750~810 |
PE-Cy7 |
Blue B |
655 |
670LP |
>670 |
PerCP, PerCP-Cy5.5 |
Blue D |
556 |
585/42 |
564~606 |
PE, PI |
Blue E |
502 |
530/30 |
515~545 |
FITC, Alexa Fluor 488, GFP |
633nm 紅光雷射 |
Red A |
735 |
780/60 |
750~810 |
APC-Cy7, APC-H7 |
Red C |
— |
660/20 |
650~670 |
APC, Alexa Fluor 647 |
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| 2. |
配備BD FACSDiva 7.0軟體,實驗數據儲存方式包括:FCS3.0/ FCS2.0數據(適用於其他分析軟體)、統計資料檔.csv儲存(使用Office Excel可開啟)及圖檔.jpg儲存方式,亦可進行採樣後螢光補償值的修正。 |
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| 功能應用 |
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| 1. |
Phenotype Analysis (Cell Surface Antigens/Markers) |
| 2. |
Intracellular Analysis (Cytokines, Signal Transduction molecules…etc.) |
| 3. |
DNA Analysis (Viability, Cell cycle, Apoptosis…etc.) |
| 4. |
Cell Fuction Analysis (Free radicals, Ca2+, Reporter genes…etc.) |
| 5. |
CBA (Cytometric Bead Array) |
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