儀器介紹
簡介
  流式細胞技術(flow cytometery)是現今生物醫學研究中不可或缺的基本技術之一。懸浮細胞檢體配合各種抗體與染劑的使用進行細胞標定後,利用流式細胞分析儀(Cell Analyzer)配備之雷射激發,可同時獲得細胞相對大小、細胞內部結構相對複雜度及螢光相對亮度等數據,以同時進行多種細胞功能與生物學特性的分析,例如分析細胞標記的種類與數量、細胞週期、細胞凋亡、細胞內鈣離子的濃度變化、粒線體膜電位的變化…等等。

※原理:
儀器運用液流加壓將樣品溶液裡的細胞送往分析槽(Flow Cell),由於管徑縮減,形成流體動力聚焦(Hydrodynamic Focusing),讓細胞成為單顆排列,依序通過打在分析槽上的雷射。每個細胞會與入射光源相互作用而產生散射光及螢光,產生的光學訊號再轉換成電子訊號,分析這些數據便可測量細胞的一系列重要物理特性及生化特性。

   
廠牌型號
  BD FACSCanto II

儀器負責人:林倖如 (聯絡電話:05-3621000 分機3949)
   
設備介紹
 
1. 儀器配備488nm與633nm兩支雷射光源,可同時偵測FSC(前方散射光)、SSC(側方散射光)及6種螢光訊號,設備規格如下表:
 

雷射光源

偵測器

LP鏡片
(nm)

BP濾片
(nm)

偵測範圍(nm)

可偵測螢光染料或螢光蛋白

488nm
藍光雷射

Blue A

735

780/60

750~810

PE-Cy7

Blue B

655

670LP

>670

PerCP, PerCP-Cy5.5

Blue D

556

585/42

564~606

PE, PI

Blue E

502

530/30

515~545

FITC, Alexa Fluor 488, GFP

633nm
紅光雷射

Red A

735

780/60

750~810

APC-Cy7, APC-H7

Red C

660/20

650~670

APC, Alexa Fluor 647

   
2. 配備BD FACSDiva 7.0軟體,實驗數據儲存方式包括:FCS3.0/ FCS2.0數據(適用於其他分析軟體)、統計資料檔.csv儲存(使用Office Excel可開啟)及圖檔.jpg儲存方式,亦可進行採樣後螢光補償值的修正。
   
功能應用
 
1. Phenotype Analysis (Cell Surface Antigens/Markers)
2. Intracellular Analysis (Cytokines, Signal Transduction molecules…etc.)
3. DNA Analysis (Viability, Cell cycle, Apoptosis…etc.)
4. Cell Fuction Analysis (Free radicals, Ca2+, Reporter genes…etc.)
5. CBA (Cytometric Bead Array)