缺乏葉酸會造成營養性和巨球性貧血。缺乏的原因可能是飲食中缺少生鮮水果、蔬菜或富含葉酸的食物，也可能因為慢性酒精中毒、藥癮、老年人或社經地位較低的個案等等。除此之外，懷孕期間葉酸血清濃度低可能和胎兒神經管缺陷有關。飲食缺乏以及吸收不良是人類缺乏葉酸的主因。葉酸為正常代謝、DNA合成和紅血球生成所須。葉酸缺乏若不治療會導致巨球性貧血。由於缺乏維生素B12或葉酸都會造成巨球性貧血，為了正確診斷貧血的病因，所以最適當的方法就是維生素B12和葉酸二項都進行檢測。