台北院區 主治醫師魏添勇

前言

人體從腎臟產生出來的尿，正常情況下應是無菌的。若在尿中有微生物存在，可稱之菌尿症（bacteriuria），除非所見的微生物是因尿液檢體收集、攜送或處理過程中受汙染所致，否則，則屬不正常現象。尿道感染（urinary tract infection ）的定義是指外尿道(external urethra)與腎(kidney)之間的微生物感染。尿道感染是臨床醫護人員最常遇到的疾病之一，因此除疾病本身的了解之外，更須進一步明瞭臨床上尿液檢驗分析及培養過程，以利對疾病做最後判斷和治療。

尿液檢體來源

依照尿液來源可分為下列項目：清潔排出之中段尿液（clean-catch midstream voided urine）、導尿檢體（catheterized specimens）、恥骨上穿次尿液（suprapubic puncture）、及腎臟穿次尿液（nephrostomy specimen）。不同尿液的來源會決定結果的判讀。所以必須記錄取得尿液的方式，以利判讀。

尿液分析

＊ 尿液分析流程

1. 將從門診或病房收集到的尿液，更換成10 ml標準試管。
2. 置入機器內判讀及校正。
3. 置入離心機內，以1800（rpm）轉速度旋轉5分鐘。
4. 倒掉上層懸浮液，取0.5ml 沉澱物，放置於有特殊刻度容器上在顯微鏡下計數。
5. 將報告輸入電腦，白血球及紅血球若數量超過500，則以>500表示；上皮細胞數量超過1000，則以>1000表示。

＊ 尿液分析項目

1. 機器判讀項目：尿糖、尿蛋白、尿膽紅素、尿膽原、尿中酸鹼度、血 尿。
2. 人工判讀項目：尿中紅血球、白血球計數，上皮細胞及其他沉渣檢查。
   a. 尿中紅血球：形狀為雙凹球形（圖1）。
   b. 白血球：形狀比紅血球大，細胞質內有明顯顆粒狀（圖2）。
   c.上皮細胞：依照從泌尿道系統不同位置來源，可分為管狀上皮細胞（tubular epithelial cell）、過渡上皮細胞（transitional epithelial cell）及扁狀上皮細胞（squamous epithelial cell ）。
   d.沉渣結晶檢查：顯微鏡底下可看到不同結晶（例如，尿酸、草酸鈣、磷酸鈣），藉此推論結石種類。
   e.此外也發現其他感染病菌，例如陰道滴蟲、念珠球菌。

尿液培養

使用無菌尿杯或無菌黑頭試管送到檢驗室，必須立刻接種。如無法立刻接種，則保存於4~8°C冰箱，不要超過6小時。

＊ 培養操作步驟

1. 檢體接種：所有尿液接種前左右搖晃5 秒鐘。
2. 利用Leukocyte esterase strip（LE）試紙檢驗，若 LE(-) 則以 0.001 ml loop接種；若 LE ? 1+, 則加用0.01ml loop接種。
3. 一般接種於BP/EMB Biplate。Biplate 為含有二種養份，分別為Blood Agar plate (BP)及Eosin methylene blue media (EMB)。Blood Agar plate (BP) 加入特殊養份如血液血清或動植物抽出物；而Eosin methylene blue media (EMB) 則可抑制革蘭氏陽性球菌生長，只讓革蘭氏陰性球菌生長。
4. 對於特定目標培養（例如Gonococcus or Salmonella）， 則以3000 rpm， 離心10 分鐘， 再取沉澱物接種。

＊ 培養條件：5% CO2 + 35°C 溫箱

＊ 判讀時間：初步判讀為接種後18~24 小時，最終判讀為接種後48小時。

＊ 結果判讀方式

1. 細菌菌落數及外觀：觀看菌落外觀形狀、顏色及數目。
2. 快速鑑定：只針對尿液中出現E coli & Proteus,進行快速鑑定判斷。
3. 生化鑑定：常用鑑定方式如下。
   a)TSI test（triple sugar iron agar）：原理為 TSI 為斜面培養基含三種醣（glucose, lactose, sucrose），並加入硫化亞鐵及phenol red指示劑；因細菌對醣類發酵反應的不同，利用氣體的產生，硫化氫的形成來鑑定革蘭氏陰性桿菌。
   b) Urease test（尿素分解?測試）：原理為細菌利用尿素分解?（urease）分解尿素而得到鹼性結果。目的在測試革蘭氏陰性桿菌產生尿素分解?能力。
4. SIM（sulfide-Indole-Motility medium）：檢查細菌分解色氨酸（L-Tryptophan）而產生Indole的能力。
5. Oxidase test：細菌利用本身氧化（oxidase）而產生顏色變化，藍色為陽性，無色為陰性。
6. 抗生素感應性試驗：當培養出菌種被診斷出後，便把不同種類抗生素貼片放入培養基上，經24小時後，判讀貼片周圍菌落被殺死後呈現無色的距離（如圖3），以決定抗生素是否對菌落為感應（sensitive）或是無效（resistance）。
7. 最後計算培養基上的菌落數，若一開始是用0.001 ml 圈環（loop）接種者則所算的數目再乘以1000則為實際結果（若一開始是用0.01 ml 圈環接種者，則乘以100）；菌落數大於100000為有意義，小於1000代表無意義。但須將尿液來源方式列入考慮，清潔排出之中段尿液和恥骨上穿次尿液，在判讀上當然不同（如表1）。

結論

尿液檢查是臨床上最常遇到但也最容易被忽略，從尿液取得方式、取得後是否馬上放置冰箱、運送過程及最後判讀結果是否何臨床上吻合等。每個環節皆須謹慎小心才能發揮它最大功能。